Методы коррекции фрагментации днк сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием в браке

Макроскопическое исследование

После получения спермы специально обученный лаборант или врач клинической лабораторной диагностики проводит её исследование. Специалист осматривает материал невооружённым глазом и оценивает следующие параметры:

  1. Консистенцию. В норме сперма густая и вязкая. Менее, чем через час под воздействием ферментов половых желёз она разжижается. Если этого не происходит, следует заподозрить воспалительное заболевание. Густой эякулят препятствует нормальному движению сперматозоидов. Консистенция спермы может изменяться и ввиду наличия патологических включений и примесей (слизи, комочков, состоящих из клеток различного происхождения).
  2. Вязкость. Её определяют путём измерения длины растяжения нити между стеклянной палочкой и поверхностью эякулята спустя час от его разжижения. Нормой является длина до 20 мм.

  3. Объём. Если контейнер, в котором доставили биологическую жидкость, градуирован, то количество измеряют непосредственно в нём, а если нет, сперму переливают в пробирку с разметкой. Объем варьируется от 2 до 6 мл, однако может доходить до 15 мл. Количество эякулята не влияет на репродуктивную функцию.
  4. Цвет. В норме семенная жидкость серовато-белого или молочного цвета, слегка опалесцирует. При появлении лейкоцитов (клеток, отвечающих за воспаление) сперма может приобретать желтоватый оттенок, эритроцитов (красных кровяных телец) — красноватый или розовый. При снижении числа сперматозоидов она становится более прозрачной.
  5. Запах. У здоровых мужчин сперма пахнет каштаном. При воспалительном процессе или длительном хранении она может приобретать гнилостный запах из-за наличия микробов.
  6. Реакцию, или pH (кислотность). Реакция спермы в норме слабощелочная или щелочная (7,2–7,8). Вследствие заболеваний простаты она приобретает резкощелочную pH. Кислой реакция становится при полной закупорке семявыводящих протоков обоих семенных пузырьков. Кислотность эякулята определяют после того, как он стал жидким, при помощи тест-полосок со специальными индикаторами, меняющими цвет при изменении среды.

Подробнее про фрагментацию сперматозоидов и тест TUNEL

В мужских половых клетках содержится генетический материал, который во время оплодотворения передается будущему ребенку. Если этот материал с повреждениями (разрывами цепочки ДНК), крайне маловероятно, что сперматозоид оплодотворит яйцеклетку.

Поврежденные спермии есть в эякуляте любого мужчины, даже если у него нет патологий репродуктивной системы. Но когда таких сперматозоидов слишком много, зачатие становится затрудненным или невозможным. Если даже оплодотворение происходит, то снижены шансы сохранить беременность.

Исследование фрагментации половых клеток позволяет подсчитать количество нормальных спермиев и спермиев с нарушенной генетической структурой. Это становится основанием для постановки или уточнения диагноза.

Каким методом лучше исследовать фрагментацию половых клеток?

Спермограмма не дает возможности выявить спермии с разорванными цепочками ДНК, необходимы специализированные методы. Таких существует несколько, самым достоверным признан тест TUNEL.

В отличие от других методик исследования фрагментации TUNEL фиксирует реальные, а не вероятные повреждения. Отсюда высокая прогнозирующая способность теста.

Как проводится тест TUNEL?

Сперму для исследования получают тем же способом, как для спермограммы. Получив назначение доктора, пациент приходит в клинику и сдает эякулят через мастурбацию. Подготовка к исследованию фрагментации методом TUNEL аналогична спермограмме.

Подробнее о процедуре сдачи спермы и подготовке к ней читайте здесь

После получения биологического материала он сразу направляется в лабораторию центра «Линия жизни». Там специалист добавляет в эякулят специальный энзим. При контакте с реагентом сперматозоиды с некачественным генетическим материалом меняют цвет. После этого они легко выявляются под микроскопом.

Подсчитав количество патологических спермиев, специалист составляет заключение, в котором в процентах указывает количество половых клеток с выраженной фрагментацией ДНК.

Расшифровка результатов теста TUNEL

Когда в эякуляте пациента не более 15 процентов патологических спермиев, это считается нормальным показателем. Если клеток с генетическими повреждениями больше, выводы о фертильности мужчины зависят от того, насколько превышена норма.

  • 15-30 процентов – естественное зачатие хотя и затруднено, но возможно. Для него может потребоваться много времени.
  • 30-50 процентов – естественное зачатие крайне маловероятно, но у пары хорошие шансы на ЭКО-беременность
  • 50-60 процентов – зачать естественным путем невозможно, шансы на успех ЭКО остаются, но они невысокие.
  • 60 процентов и больше – успех ЭКО с собственными сперматозоидами маловероятен.

Что делать, если некачественных сперматозоидов много?

Пациенты нашего центра не остаются один на один с «плохими» результатами исследования фрагментации ДНК. Если в сперме много клеток с некачественным генетическим материалов, врач разработает тактику дальнейших действий. Пациенту может быть назначена терапия, направленная на уменьшение количества «сломанных» сперматозоидов.

Но часто терапия заведомо бесперспективна. Чтобы не терять драгоценного времени, доктор рекомендует паре использовать для достижения беременности вспомогательные репродуктивные технологии. В большинстве случаев речь идет о программе ЭКО с ИКСИ. Врач выберет сперматозоид без повреждений и искусственно внедрит его в цитоплазму яйцеклетки. В тяжелых ситуациях сперматозоиды забираются из яичка пациента методом TESA. Внутри яичка процесс фрагментации менее интенсивен, есть шансы отыскать нормальные клетки.

Что такое физиологическая фрагментация ДНК сперматозоидов в сперматогенезе

В организме человека сперматозоид – самая маленькая клетка. Для уменьшения его размера в процессе сперматогенеза (созревания спермия и превращения в зрелый сперматозоид) происходит специфическое преобразование. Ядро уплотняется за счет механизма конденсации хроматина. Большая часть цитоплазмы «выбрасывается» из мужской половой клетки в виде «цитоплазматической капли», остаются только необходимые органеллы.

Схематичное изображение упаковки ДНК в хромосому

Для сборки и упаковки нитей ДНК в хромосомы необходимы белки гистоны. Из ядра будущего сперматозоида удаляются гистоны, а ДНК связывается с белками-протаминами. Это позволяет плотно конденсировать хроматин и уменьшить ядро сперматозоида. В это время происходит «расплетание» участков ДНК и на стадии созревания они должны снова соединиться, но это происходит не всегда. У части сперматозоидов этот процесс остается незавершенным – это физиологическая фрагментация ДНК сперматозоидов. У здоровых мужчин степень фрагментации не превышает 15%.

Суть метода Tunel

Для проведения теста сперму сдают как обычную спермограмму. Из образца биоматериала часть используется для светооптического исследования, где оцениваются морфологические качества сперматозоидов и состав спермы. Часть исследуется по методу Tunel.

В пробу для оценки фрагментации добавляют раствор меченных флюоресцирующих нуклеотидов, которые способны связываться с обрывками нитей ДНК. Нуклеотиды встраиваются в разорванную цепочку и выступают в качестве меток, которые флуоресцируют под микроскопом. Затем высчитывается процентное содержание «меченых» сперматозоидов и выдается результат.

Правила и условия сдачи анализа

Перед получением эякулята необходимо помочиться (смыть мочой содержимое мочеиспускательного канала), затем помыть руки и обмыть половые органы с мылом. Образцы спермы с помощью мастурбации собирают в стеклянный или пластиковый стерильный градуированный контейнер с широким горлом. Очень важным является собрать весь эякулят, особенно первую и последнюю его порцию, в противном случае результаты спермограммы будут недостоверны. Анализ спермы возможен при её объёме не менее 1 мл. Срок выполнения исследования — 1 день. Результаты спермограммы действительны в течение 3 месяцев.

Правила сбора эякулята для анализа в домашних условиях

Собрать сперму на анализ можно в домашних условиях и доставить в лабораторию по принципу «чем раньше, тем лучше», но не более чем через 1 час после семяизвержения. При транспортировке биоматериал должен сохранить температуру тела, нельзя переохлаждать сперму. Можно, например, везти во внутреннем нагрудном кармане одежды или под мышкой. Чтобы ускорить доставку биоматериала в лабораторию, на транспортировочном контейнере желательно самостоятельно указать Ф.И.О., возраст и точное время семяизвержения.

Исследование фрагментации ДНК методом TUNEL

По данным статистики в почти половине бесплодных браков к невозможности зачать приводят сбои в мужской репродуктивной функции. Возможных причин бесплодия у мужчины много, одна из них – нарушения целостности генетической структуры спермиев. Для выявления этой проблемы в репродуктологических клиниках используется исследование фрагментации ДНК. Анализ выявляет разрывы в ДНК-цепочках половых клеток. Чем выше процент таких повреждений, тем ниже шансы на наступление беременности.

Где сделать исследование фрагментации ДНК в Москве?

Центр репродукции «Линия жизни» специализируется на диагностике и лечении бесплодия, как женского, так и мужского. В наших клиниках пациентов ведут кандидаты медицинских наук, лучшие московские репродуктологи и урологи-андрологи. Анализ фрагментации ДНК проводится наиболее эффективным методом.

  • Для выявления сперматозоидов с фрагментированной ДНК мы используем тест TUNEL – это самый авторитетный из существующих сегодня методов
  • Для уточнения диагноза могут быть проведены другие диагностические мероприятия с доказанной эффективностью
  • После выявления проблемы разрабатывается тактика достижения беременности.

Она может включать специализированную терапию, вспомогательные репродуктивные технологии

Когда нужно исследовать фрагментацию ДНК методом TUNEL?

Исследование не входит в число обязательных, назначаемых всем без исключения пациентам репродуктивных клиник. Наши репродуктологи и андрологи назначают его в следующих случаях:

  • Когда причину мужского бесплодия не удалось выявить базовыми методами диагностики (спермограмма и др.).
  • При нескольких неудачных попыток ЭКО в анамнезе.
  • При получении в программах ЭКО эмбрионов низкого качества.
  • Если у мужчины диагностировано варикоцеле.
  • При привычном невынашивании беременности у партнерши.

Генетические исследования

Генетические исследования позволяют выявить или исключить нарушения в наследственном материале (геноме). Он представляет собой молекулы ДНК в составе хромосом. В соматических клетках (не принимающих участия в размножении) двойной набор хромосом — 46 пар — 1 пара половых хромосом (XX у женщины и XY у мужчины) и 22 пары неполовых (аутосом). В сперматозоидах и яйцеклетках этот набор одинарный — 23 (22 аутосомы и X/Y).

Тест на фрагментацию ДНК

Фрагментация ДНК — это разрушение цепочек генетической информации. Чем больше таких разрушений, тем меньше вероятность наступления беременности. Причинами этой патологии могут быть как внешние факторы (воздействие высоких температур, рентгеновского излучения, химиотерапии), так и внутренние (лихорадка, острые и хронические воспалительные заболевания, варикозное расширение вен яичка и нарушения на молекулярном уровне, например, если повреждённые сперматозоиды не отбраковываются организмом). В норме количество сперматозоидов с разрушенной ДНК не должно превышать 15%.

FISH-анализ

FISH-анализ спермы позволяет определить частоту сперматозоидов с наследственными аномалиями. Панель хромосом, используемых для проведения исследования, включает половые хромосомы (X и Y) и аутосомы 13, 18 и 21. В норме в каждом сперматозоиде должно быть по одному сигналу хромосом 13, 18, 21 и один сигнал или X, или Y. Если частота аномалий превышена, то проводят морфологический отбор перед тем, как внедрить сперматозоид в яйцеклетку.

Виды спермограммы

В зависимости от формы, количества и концентрации сперматозоидов, их подвижности и жизнеспособности, а также от наличия других клеток и включений выделяют следующие виды спермограммы:

  • нормозооспермия (качественные и количественные характеристики эякулята в пределах нормальных значений);
  • олигозооспермия — концентрация и/или количество сперматозоидов ниже допустимого интервала;
  • астенозооспермия — число подвижных клеток ниже нормы;
  • тератозооспермия (изменение морфологических свойств превышает допустимый порог);
  • олигоастенотератозооспермия (сочетание трёх последних разновидностей);
  • глобозооспермия — отсутствие акросомы;
  • азооспермия — отсутствие мужских гамет в сперме;
  • аспермия — отсутствие эякулята.

Разновидности тестов

Анализ на фрагментацию ДНК делается несколькими способами, основанными на разных принципах. В одном подсчитываются «правильные» клетки, в другом фиксируются именно дефектные. На основе полученных данных определяется процент тех и других. Они отличаются ценой и сроком готовности. Наиболее распространены два вида исследования:

Методика tunel

Этот тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов позволяет посчитать клетки с дефектами генетической цепочки и оценить масштаб изменений.

Исследователь смешивает порцию спермы с ферментом – белком-катализатором биохимических реакций. Он проникает в структуру клетки и заполняет промежутки между фрагментами. Места разрывов при этом подсвечиваются мечеными нуклеотидами. Лаборант фиксирует флуоресцирующие сперматозоиды с помощью оптического микроскопа. Спермии с целостными ДНК при этом не светятся.

Тест halo

Для этого вида тестирования берется минимум 200 (максимум 500) морфологически безупречных сперматозоидов. Обработанные специальным особым реактивом клетки с целостной структурой показывают характерную картину: петли ДНК расширяются, что через оптический микроскоп выглядит как свечение вокруг сперматозоида – «хало». Подсчитываются спермии с большим и средним «хало» и видимым хвостом. А вокруг клеток, несущих информацию не целостную, а в виде фрагментов, такого визуального эффекта не наблюдается. В норме для естественного зачатия носителей дефектных цепочек по тесту halo должно быть не более 20%.

Этот тест на фрагментацию ДНК подсчитывает количество полноценных сперматозоидов. На основе информации делается вывод о процентном выражении носителей поврежденной информации.

Анализ фрагментации ДНК методом HALO выполняется намного быстрее, чем методом tunel, и считается более информативным и точным.

Поддается ли лечению

Фрагментация ДНК – показатель важный для оценки способности мужчины к оплодотворению, но он не является статичным. Тесты, сделанные в разное время, могут дать не идентичные результаты

Об этом важно помнить, делая выводы о собственной фертильности

На возможность мужчины зачать здорового ребенка влияет возраст мужчины, образ жизни, привычки, состояние здоровья, наследственность. Многие из названных факторов поддаются контролю человека. Даже солидный возраст потенциального отца – не помеха. Природа предусмотрела возможность восстановления поврежденной ДНК мужчины ресурсами яйцеклетки. Правда, эту способность женщина с годами утрачивает.

Помочь восстановить цельность генов в половых клетках может и антиоксидантная терапия, призванная бороться со свободными радикалами.

Если анализ не улучшается после лечения, можно воспользоваться достижениями современной медицины. С помощью применения такого метода репродукции человека, как ИКСИ, фрагментация генов даже в значениях выше 30% — не приговор. Поскольку репродуктолог после исследования многих спермиев отбирает всего один – наилучшего качества. Его вводят в женскую половую клетку, а после слияния зиготу помещают обратно в матку.

Методы диагностики фрагментации ДНК сперматозоидов

Изучение такой мужской патологии, как фрагментация нуклеиновых цепей сперматозоидов, требует проведения целого ряда исследований и диагностик. Современная медицина в данной области представлена несколькими видами тестов. Каждый анализ помогает обнаружить имеющиеся генетические патологии, а также имеет свои преимущества и недостатки.

Самым популярным методом является TUNEL-тест. Проводят его в лаборатории посредством смешивания семенной жидкости пациента со специальными реактивами. Энзим, используемый в качестве реактива, окрашивает сперматозоиды, имеющие генетические повреждения. Анализ выполняют под микроскопом, подключенным к компьютеру. Расшифровка полученных данных содержит бланк исследования и снимок спермиев пациента (обычных и окрашенных). В бланке указаны такие данные, как объем здоровых (норма и фактическое состояние) и поврежденных спермиев, а также общее заключение о состоянии здоровья пациента.

Направление на такой анализ можно получить у лечащего врача – репродуктолога, на учете у которого находится пара, мечтающая зачать малыша. Расшифровывать результаты, устанавливать точный диагноз и назначить лечебную терапию также должен лечащий специалист. Основой последней всегда является устранение причины, приводящей к разрушению здоровых сперматозоидов.

TUNEL-тест имеет ряд определенных преимуществ. В первую очередь, его результаты – это корректные и реальные цифры. Также данный тест используют в качестве прогнозированного исследования, определяя шансы на выздоровление на его данных. Пороговая величина анализа составляет 15%, а иногда и больше. Два цвета спермиев на снимке помогают легко получить предварительное заключение о состоянии семенной жидкости пациента даже без расшифровки врача, т. е. пациент может сам понять, превышена ли норма поврежденных спермиев или нет.

Провести данный тест рекомендуют мужчинам при:

  • бесплодии, причины которого не установлены;
  • неоднократных неудачных попытках ЭКО;
  • неоднократных самопроизвольных абортах, особенно на раннем сроке;
  • варикозе семенных канатиков;
  • пациентам после 45 лет;
  • если семенная жидкость подвергалась криозаморозке;
  • лихорадке с высокой температурой, длившейся более трех месяцев.

Как снизить процент фрагментации ДНК спермы

Стратегия повышения мужской фертильности включает:

  1. устранение варикоцеле;
  2. здоровый образ жизни;
  3. антиоксидантную терапию;
  4. применение новейших достижений ВРТ;
  5. лечение, направленное на снижение количества внеклеточной ДНК.

Хирургическое лечение варикоцеле

Если варикоцеле единственная причина бесплодия, то варикоцелеэктомия (удаление варикозно расширенных вен яичка) приводит к улучшению показателей спермограммы: увеличивается концентрация сперматозоидов и подвижность. Уменьшается фрагментация ДНК спермы, оксидативный стресс, улучшается морфология половых клеток. Повышается частота наступления спонтанной беременности и уменьшается количество случаев невынашивания в 1 триместре. У прооперированных мужчин с нормозооспермией (нормальными показателями спермограммы) и проведенной варикоцелеэктомией достоверно снижена частота повторного невынашивания беременности.

Стандартный анализ семенной жидкости – спермограмма

Спермограмма – это самый широко известный тест эякулята у мужчин. Этот анализ помогает в короткие сроки установить причины, по которым возможность оплодотворения у мужчины нарушается. Задачи спермограммы довольно широки, но первоочередной из них является изучение всех важных параметров семенной жидкости. К таким показателям относят общий объем семенной жидкости, выделенной при семяизвержении, кислотность спермы, ее морфологические особенности. Отдельно изучается норма подвижности и активности сперматозоидов.

Поможет данный тест определить и такие параметры, как количество лейкоцитов: их норма должна превышать отметку в 1 млн шт. на мл спермы. Результаты МАР-исследования должны составлять не более 10%, а время, за которое сперма разжижается, должно находиться в пределах от получаса до часа. Важен запах семенной жидкости (у здорового мужчины она пахнет каштаном), и цвет. Нормой считаются такие оттенки спермы, как белый, кремовый и слегка розовый.

Согласно постановлениям Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) спермограмма имеет следующие нормы:

  • Объем – не менее 2-х мл;
  • Кислотность – от 7,2 до 8,0 pH;
  • Концентрация – норма 20 млн/мл;
  • Число спермиев – не более 4-х млн;
  • Подвижность спермиев – не выше 50%;
  • Спермии нормальной формы – не менее 30%.

Именно такие показатели должна содержать расшифровка анализа здорового пациента. Любые отклонения от норм требуют более тщательного изучения и консультации с лечащим врачом. Но обычно врач сначала выписывает направление на анализ, а уже после расшифровывает полученные данные и делает выводы о состоянии здоровья пациента.

Какие анализы на фрагментацию можно сдать

Наличие патологии в работе репродуктивной функции определяется по нескольким методикам. По итогам исследования врач делает выводы о том, что вызвало нарушения, и назначает необходимое лечение.

В ситуации, когда фактор, повлиявший на возникновение бесплодия, не установлен и обычные исследования не помогают, назначают тест на уровень дефрагментации. Поводом становятся:

  • варикоцеле;
  • возраст мужчины после 45 лет;
  • неустановленная причина бесплодия;
  • многократные выкидыши у партнерши;
  • подготовка к ЭКО;
  • проверка эякулята для его консервации и донорства.

Для того чтобы определить наличие у пациента такого явления, как фрагментация ДНК спермограммы, необходимо провести ряд анализов и обследований.

Данные о фрагментации невозможно получить только традиционным исследованием. Спермограмма выявляет следующие данные:

  • объем эякулята;
  • подвижность спермиев;
  • их общее количество;
  • численность неподвижных сперматозоидов;
  • наличие здоровых клеток;
  • наличие эритроцитов;
  • концентрация лейкоцитов;
  • физические показатели спермы: цвет, запах, консистенция.

Цель анализа фрагментации ДНК спермограммы – проверка целостности генетического материала.

  1. TUNEL–тест – метод исследования сперматозоидов на фрагментацию ДНК.
    В данном случае изучают соотношения поврежденных и здоровых клеток под микроскопом. Определенные энзимы добавляются в биоматериал, реагент их окрашивает. В результате клетка с патологией выглядит четко подцвеченной, тогда как здоровая – распределяет реагент не только внутри, но и вокруг себя.
    По завершении исследования пациенту выдается снимок и подробное описание. Приложением к расшифровке анализа идет анкета-выписка с указанием количества поврежденных и здоровых сперматозоидов. На основании полученных цифр врач планирует дальнейшее лечение, прогнозирует результат терапии.
    Подготовка перед забором биоматериала для исследования предполагает половое воздержание не менее 3–4 дней, а также отказ от алкоголя. Не рекомендуется посещение бани, сауны. Исключается использование подогрева сидений в автомобиле. Прием лекарственных препаратов в подготовительный период возможен только по согласованию с лечащим врачом. Забор семенной жидкости производится в день проведения процедуры.
    Методика позволяет провести точное исследование, что гарантирует реалистичные выводы и прогнозы последующей терапии.
  2. Тест SCSA (или HALO) – изучение хроматина сперматозоидов.
    Индекс фрагментации (ИФ) не определяется при микроскопическом изучении качества семенной жидкости. ИФ нужен для назначения соответствующего лечения бесплодия при нарушении целостности ДНК клеток. Индекс фрагментации ДНК дает информацию об эффективности различных методов терапии, при этом оценка в процентном соотношении дается только сперматозоидам:
    ИФ > 0–15%: беременность возможна естественным путем.
    ИФ > 15–25%: оплодотворение естественным путем возможно, но время ожидания возрастает.
    В случае если беременность не наступает, можно провести курс искусственного осеменения.
    Если патологии есть и в женском организме или пара в более зрелом возрасте, врач может дать показания к ЭКО.
    ИФ > 30%: Шансов оплодотворения естественным путем или посредством искусственного осеменения мало. Рекомендовано ЭКО.
    ИФ > 50%: Низкая вероятность наступления беременности при помощи ЭКО. Применение ИКСИ дает более высокие шансы на оплодотворение.
    ИФ > 60%: Шансы на наступление беременности очень низкие. Единственная возможность – ИКСИ или сперма донора.

Подготовка к сдаче анализа

При направлении пациента на спермограмму врач обязан подробно объяснить, какие условия подготовки должны быть выполнены перед исследованием для получения достоверного результата. Мужчине необходимо:

  • не употреблять алкоголь в любых количествах в течение 7–10 дней;
  • отказаться от курения не менее, чем на неделю;
  • воздержаться от семяизвержений в течение 2–4 суток;
  • накануне исключить тяжёлые физические нагрузки, конфликтные ситуации, ночью рекомендуется обеспечить себе полноценный отдых;
  • постараться исключить в течение 2,5 месяцев воздействие токсических факторов, перегревание (бани, сауны);
  • при наличии воспалительных заболеваний мочеиспускательного канала, предстательной железы, семенных пузырьков перед исследованием провести соответствующее лечение и выждать не менее одного месяца.

Перед получением эякулята необходимая специальная подготовка

«Синергин» против фрагментации

Для борьбы с повышенным количеством сперматозоидов с фрагментированной ДНК существуют вещества с антиоксидантным действием, например, некоторые витамины, коэнзим Q10, каротиноиды, флавоноиды. Их помощь в защите ДНК сперматозоидов была подтверждена научными методами.

В 2016 году состоялось клиническое исследование с участием 27 супружеских пар, столкнувшихся со следующими проблемами:

  • ненаступление беременности при нормальных значениях спермограммы;
  • неоднократные выкидыши;
  • безрезультатные попытки искусственного оплодотворения.

Целью исследования было изучение влияния комплекса «Синергин» на фрагментацию сперматозоидов. «Синергин» содержит высокую дозировку мощных природных антиоксидантов: коэнзим Q10, витамины Е и C, рутин, ликопин и бета-каротин.

Мужчины-участники эксперимента принимали «Синергин» три месяца, поскольку именно такой срок необходим для созревания сперматозоидов.

Количество сперматозоидов с поврежденной ДНК у мужчин в результате наблюдения составило:

  • до начала приема «Синергина» – 23 %;
  • через 1 месяц – 17,2 %;
  • в конце исследования – 14,8 %.

Таким образом, за период исследования процент сперматозоидов с фрагментацией ДНК уменьшился на 35,9 % и стал нормальным.

Исследование показало, что «Синергин» вполне закономерно повышает количество антиоксидантов в сперме:

  • до наблюдения – 1,21 нМ/мл,
  • по итогам наблюдения – 2,54 нМ/мл (больше, чем в половину!).

Дополнительно наблюдение выявило, что «Синергин» не имеет побочных эффектов, не вызывает аллергических реакций.

Однако самым приятным итогом исследования эксперимента стало то, что за время исследования у трех пар получилось стать родителями, причем роды прошли нормально и своевременно!

Очень важно после улучшений в течение первого месяца приема «Синергина» не прекращать прием, чтобы добиться максимально возможных результатов.

НЕ ЯВЛЯЕТСЯ РЕКЛАМОЙ. МАТЕРИАЛ ПОДГОТОВЛЕН ПРИ УЧАСТИИ ЭКСПЕРТОВ.

Причины фрагментации

Механизмы, которые приводят к фрагментации нитей ДНК, до сих пор до конца не исследованы. Одной из наиболее вероятных версий считается окислительный стресс сперматозоидов − повреждение их мембран, белков и ДНК свободными радикалами (активный кислород – ROS, или АФК). Последние являются продуктом обменных процессов в клетках, естественным компонентом среды, в которой вызревают сперматозоиды, и семенной плазмы. В норме радикалы нейтрализуются веществами-антиоксидантами, но в ряде случаев (при воспалительном процессе, иммунных нарушениях) баланс нарушается, активных форм кислорода становится слишком много. Выявить наличие АФК можно при помощи ROS-теста.

Основные причины окислительного стресса, приводящего к фрагментации ДНК:

  • Хронические воспалительные процессы в органах малого таза: яичках, их придатках, простате, мочевом пузыре, даже в копчике (инфекция легко мигрирует с кровотоком, периодически активизируясь).
  • Варикоцеле – расширение вен мошонки, приводящее к застою крови и нарушению питания яичек.
  • Длительное воздержание (чем дольше сперматозоид находится в придатке яичка, тем выше вероятность его повреждения оксидантами).


Для чего применяется исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах и что такое TUNEL test рассказывает ведущий уролог-андролог урологического центра «Юнона» Малышевич Виктория Владимировна

  • Интоксикация (курение, алкоголь, пестициды, гербициды). Исследования (Mutat Res за 1996 г, № 351(2), стр. 199-203, Cancer Inst за 1997 г, № 89(3), стр. 238-244) выявили прямую зависимость между онкологическими заболеваниями у детей и курением их отцов (сперматозоиды которых подверглись окислительному повреждению ДНК).
  • Длительный прием медикаментов: препараты для лечения гипертонии, подагры, противосудорожные, метадон, некоторые антибиотики.
  • Аутоиммунные нарушения, при которых организм вырабатывает антитела против собственных половых клеток.
  • Злоупотребление кофе (более 300 г в день). Кофеин способен провоцировать повреждения ДНК и препятствовать восстановлению нитей.

Есть ли у вас вредные привычки?
Poll Options are limited because JavaScript is disabled in your browser.

Развёрнутый анализ

Помимо базового исследования, выполняют развёрнутый анализ эякулята. Он включает в себя:

  • стандартный анализ, рекомендованный ВОЗ;
  • морфологию по Крюгеру;
  • МАR-тест.

Морфология по Крюгеру

Морфология по Крюгеру — это исследование внешнего вида мужских гамет. Оно более углублённое и позволяет точно определить способность к проникновению в яйцеклетку.

Форму сперматозоидов исследуют на специально окрашенных препаратах спермы под объективом микроскопа. При этом увеличение происходит примерно в 400 раз. В мужских половых клетках различают следующие части:

  • головку. Она должна быть овальной формы, 4,0–5,5 мкм в длину и 2,5–3,5 мкм в ширину. Головка сперматозоида может классифицироваться как нормальная только в том случае, если она имеет нормальную акросому. Все остальные формы сперматозоидов считаются морфологически аномальными;

  • акросому;
  • шейку;
  • среднюю (промежуточную) часть. В норме она тонкая, шириной примерно 1 мкм и в 1,5 раза длиннее головки;
  • хвост. Он тоньше средней части, прямой, длиной около 45 мкм. Обеспечивает подвижность сперматозоида;
  • цитоплазматическую каплю (остаток внутренней жидкой среды клетки — цитоплазмы). Её размер не должен превышать 30% длины головки. Если эта величина больше, то нарушается способность сперматозоида осуществлять оплодотверение

Патологические формы сперматозоидов

Различные аномалии строения частей мужских половых клеток снижают шансы на зачатие естественным путём. Выделяют следующие патологические формы сперматозоидов:

  • с дефектами головки:
    • по размерам (большие, маленькие);
    • по форме (конические, грушевидные, круглые);
    • с несимметрично расположенной акросомой;
    • по количеству (двойные и множественные);
  • с дефектами шейки и средней части:
    • «склонённая» шейка (шейка и хвост образуют угол 90° к длинной оси головки);
    • асимметричное прикрепление средней части к головке;
    • утолщённая или неравномерная средняя часть;
    • патологически тонкая средняя часть;
    • любая комбинация данных признаков;
  • с дефектами хвоста:
    • короткие;
    • множественные;
    • в виде шпильки;
    • сломанные;
    • наклонные (угол больше 90°);
    • неравномерной толщины;
    • с тонкой средней частью;
    • с закрученным концом;
    • с комбинацией дефектов.

Оценка по критериям Крюгера происходит путём подсчёта нормальных и патологически изменённых сперматозоидов в эякуляте. Если клеток с правильным строением более 14%, то вероятность зачатия высокая, если 4–14% — снижена, 0–3% — оплодотворение невозможно.

MAR-тест

MAR-тест позволяет выявить наличие антител к сперматозоидам.

Если по какой-то причине мужские половые клетки тоже становятся «чужими», то срабатывает подобный механизм защиты. Вследствие этого сперматозоиды склеиваются, что может снизить возможность оплодотворения. Результат анализа может быть двух видов:

  • положительный (число клеток, покрытых антителами, 50% и более);
  • отрицательный («связанных» клеток менее 50%).

Положительный тест означает, что зачатие затруднено; отрицательный — что оплодотворение данным материалом возможно. У здорового мужчины этот показатель составляет не более 10%.

Как проверить повреждение ДНК в сперматозоидах?

К сожалению, обычная спермограмма не может оценить степень повреждение генетического материала. Фрагментация ДНК спермограммы может быть проверена разными методами. Одним из самых авторитетных и известных является методTUNEL (аббревиатура с английского, которая переводится как метод TdT-опосредованной метки dUTP-конца разрыва цепи ДНК).

После добавления в эякулят особых реагентов, его рассматривают в микроскопе с определенным разрешением. Параллельно считают процентное соотношение сперматозоидов с нормальной и повреждённой ДНК. На рисунке ниже представлено как выглядит сперматозоид с нормальной и повреждённой ДНК под микроскопом.

Подготовка к этому исследованию включает в себя:

  1. Половое воздержание 2-4 дня.
  2. Отказ от курения и алкоголя за неделю до исследования.
  3. Прием лекарственных средств должен отдельно обсуждаться с доктором.
  4. Отказ от тепловых процедур, посещения бань, саун, подогрева сиденья в автомобиле.

Для анализа нужна сперма пациента, которую собирают путем мастурбации в условиях лаборатории. Через несколько дней после исследования на руки пациенту выдают бланк с результатами. В норме фрагментация такой спермограммы не должна превышать 15 %.

Что становится причиной проблемы?

Существует более десятка различных причин, которые могли вызвать повреждения ДНК мужской половой клетки. Самые частые из них:

  • отдельные нюансы образа жизни: вредные привычки, стрессы, переутомление, лишний вес и др.;
  • тяжелые производственные условия: токсические продукты, аллергизация мужского организма;
  • варикоцеле;
  • половое воздержание в течение длительного времени;
  • инфекционно-воспалительные болезни репродуктивных органов (простатит, уретрит и др.);
  • генетическая предрасположенность и врожденные аномалии половых органов;
  • некоторые сопутствующие болезни (аутоиммунная патология, сахарный диабет и др.).

Отдельные причины не поддаются коррекции, но на другие можно успешно повлиять сменой образа жизни или лечением инфекционной патологии.

HBA-тест

Исследуя спермограмму, можно легко оценить её структурные, качественные и количественные характеристики. Но что делать, если нарушений с их стороны не выявляют? В этом случае прибегают к выполнению HBA-теста. Суть метода заключается в выявлении зрелых сперматозоидов. Всё дело в том, что они способны взаимодействовать с комплексом, расположенным на поверхности яйцеклетки. В его состав входит гиалуроновая кислота — именно с ней связывается созревшая мужская гамета. Это является обязательным условием для оплодотворения. Клетки-предшественники сперматогенеза (стволовые) и промежуточные половые клетки (сперматогонии, сперматоциты и сперматиды) к такому контакту не способны.

Оценку HBA-теста проводят по таким критериям:

  • показатель зрелости 60% и более — норма,
  • менее 60% — превышено число незрелых сперматозоидов.
Ссылка на основную публикацию