HLA-типирование супругов

Понятие HLA-типирования и показания к назначению анализа

HLA – это человеческие лейкоцитарные антигены, или система тканевой совместимости человека. HLA является человеческим вариантом главного комплекса гистосовместимости. Его основное предназначение — регулирование работы иммунной системы. Гены, кодирующие HLA, расположены в 7 локусе 6 хромосомы. Этими генами кодируются атигенпредставляющие белки, расположенные на поверхности клеток.

Поскольку данные антигены определяют иммунитет, их необходимо учитывать при трансплантации органов. Игнорирование этого фактора приводит к отторжению пересаженного органа. HLA может уменьшать или увеличивать вероятность развития онкологических опухолей, вызывать появление аутоиммунных недугов.

Немалую роль система антигенов играет в выборе полового партнера. Проведенные в 1980-х гг. исследования показали, что женщины выбирают мужчин с отличающимся HLA. Комбинированные оральные контрацептивы подавляют биологический механизм выбора, и женщин, наоборот, начинают привлекать мужчины с одинаковым HLA.

Чем обусловлен такой выбор? Дело в том, что плод наследует комплекс антигенов от обоих родителей

Для успешного течения гестации важно, чтобы HLA у отца и матери был разным и, как следствие, отличался у матери и эмбриона. Если окажется, что система совместимости у беременной женщины и у ребенка одинаковая, организм матери воспримет тело эмбриона как свои клетки

Иммунная система решит, что это не чужеродный организм, а опухоль, новообразование, и будет атаковать клетки эмбриона.

Совпадение HLA приводит к хроническому невынашиванию, выкидышам, в том числе при ЭКО. Невозможность выносить ребенка является прямым показанием к диагностике лейкоцитарных антигенов, которая называется HLA-типированием.

Вопросы к доктору

Вопрос: У нас с мужем совпадение по трем аллелям 2-го класса антигенов HLА. Прочитала, что нужно принимать иммуноглобулин. Будет ли эффект от такой терапии?

Ответ: Совпадение в паре по антигенам HLА является предметом жарких споров. Нет доказанных данных о связи совпадений с невынашиванием беременности. Поэтому рекомендовать иммуноглобулин или переливание лимфоцитов мужа при этих состояниях считают нецелесообразным. Следует исключить все другие факторы, влияющие на невынашивание: болезни органов репродуктивной системы, аллергию и др.

Вопрос: После проведения анализа и выявления HLА-совместимости по нескольким генам у дочери с ее мужем, доктор порекомендовал провести ей активную иммунизацию. Что это значит и поможет ли это?

Ответ: Активная иммунизация – это введение в организм матери культуры очищенных лимфоцитов мужа. Такая манипуляция повторяется несколько раз и призвана приучить иммунную систему женщины распознавать антигены супруга. Эффективность этого способа подвергается сомнению и окончательных доказанных данных по этой процедуре пока нет.

Вопрос: Я в браке за двоюродным братом. Мы решили завести ребенка, но родственники пугают нас, что у малыша может быть генетическая патология. Как нам быть?

Ответ: В таких браках существует риск развития ребенка с генетической патологией около 7-10 %, при условии, что в роду нет генетических заболеваний и других случаев кровнородственных браков. Однако, риск развития ребенка с генетической патологией существует и в обычной паре. Если вы с мужем твердо решили завести малыша, обратитесь к специалисту, который проанализирует вашу ситуацию и поможет вам завести здорового ребенка.

HLA типирование

Высокая схожесть HLA-цепочек у отца и матери — частая причина бесплодия. Если семейная пара решила родить ребенка при помощи ЭКО, врачи могут назначить пройти HLA типирование — специальный тест, который покажет степень схожести HLA-цепочек у отца и матери. Фактически HLA типирование представляет анализ полиморфизма HLA. Анализ можно осуществить двумя способами:

Серологический метод HLA-типирования. Серологический метод основан на анализе антигенов. Для проведения анализа берется суспензия T-лимфоцитов (для определения антигенов 1 класса) и суспензия B-лимфоцитов (для определения антигенов 2 класса). Обычно для этого у будущих родителей берется кровь из вены. Чтобы выделить T- и B-лимфоциты из крови, врачи используют иммуномагнитную сепарацию или центрифугирование. Предпочтение отдается первому методу, поскольку при центрифугировании многие клетки крови гибнут. После отделения лимфоцитов от других компонентов крови врачи используют специальную сыворотку, которая реагирует только с определенными типами антител. Это позволяет точно определить состав HLA-цепочки. У этого метода следующие недостатки — пониженная экспрессия HLA-антигенов, вероятность возникновения перекрестных реакций и некоторые другие.

Молекулярно-генетический метод HLA-типирования. Этот метод основан на анализе участка 6 хромосомы ДНК, где расположены гены, отвечающие за синтез HLA. Молекулярно-генетический анализ проходит в несколько этапов. Сперва врач берет кровь из вены у отца и матери. Потом при помощи специальных манипуляций из крови выделяется чистая ДНК или лейкоцитарная суспензия. После этого проверяется реакция выделенной ДНК со специальными одноцепочечных ДНК, которые чувствительны лишь по отношению к HLA-локусу определенного типа. Использование данной методики позволяет получить точную копию ДНК. После получения точной копии ДНК врачи проводит визуальный анализ, который показывает, родит ли пара ребенка или нет. Молекулярно-генетический метод точнее серологического, поскольку при анализе используются стандартизированные образцы. Данный метод типирования обладает еще одним преимуществом — его результаты не только точны, но и подробны, что позволяет идентифицировать как антигены, так и аллели.

Свойства и типы HLA

HLA в переводе означает «лейкоцитарный человеческий антиген», который отвечает за реакции гистологической совместимости. У каждого человека имеется свой уникальный набор HLA-генов и HLA-молекул. Потомство получает половину HLA-генов от родителей.

Что такое HLA-типирование 2 класса? Наиболее распространенными являются «неклассические» и «классические» гены HLA. Интерес представляют первые HLA 2-го класса, основной функцией которых является антигенное распознавание и межклеточное взаимодействие, обеспечение устойчивости организма к инфекциям. Однако у них есть некоторые минусы – такие гены зачастую становятся причиной возникновения аутоиммунных патологий и проблем в период беременности.

Следующие шаги в HLA

Вопрос: «Как быть дальше?» беспокоит все супружеские пары, у которых были обнаружены генетические сходства по результатам HLA. Чтобы ответить на него, пара должна решить, захотят ли они совершать усилия снова и снова, чтобы зачать общего малыша, оценивая все риски, или воспользуются услугами донорских банков спермы. Так как выбирать будет очень непросто, перед принятием решения, вы должны удостовериться, что у вас имеется достаточно сведений. Если понадобится, выясните точку зрения нескольких экспертов в области генетики и иммунологии.

Если супруги выбирают дальнейшие попытки зачатия общего ребенка, мы можем рекомендовать иммунизацию — активную или пассивную.

Активная иммунизация

На иммунитет женщины увеличивается антигенная нагрузка, при введении концентрированной культуры лимфоцитов мужа или донора. С помощью данного метода организм женщины научится узнавать клетки супруга. Данный метод осуществляется при помощи медикамента, сделанного из крови супруга или донора.

Позиция докторов (генетиков и иммунологов), касательно результативности иммунотерапии лимфоцитов, были поделены одинаково. Первая половина этого метода рассматривает его как возможность повысить рождаемость, а другая — не видит никакого смысла. Определенно, активная иммунизация не исследована полностью.  Конечных сведений о ее результативности пока нет. Но, все же, некоторые ученые полагают, что этот метод предоставит возможность родить ребенка, но не полностью избавит родителей от вероятной опасности появления на свет ребенка с наследственными болезнями. К сожалению, эта процедура иммунизации лимфоцитов возможна только в некоторых мегаполисах.

Анализы и консультация генетика

Консультация генетика при планировании беременности обязательно включает в себя расшифровку полученных результатов генетических анализов. Ведь подтвердить или опровергнуть диагноз могут только они. Анализы на генетику при планировании беременности делаются около двух недель. Для исследования понадобится венозная кровь двоих супругов.

Особыми реагентами из крови выделяют лейкоциты, ведь на них содержится наибольшее количество антигенов. При этом генетики используют метод цепной полимеразной реакции, который позволяет точно определить HLA-фенотип.

Расшифровывать результаты таких анализов и делать выводы о наличии генетической несовместимости может только специалист в области генетики.

В медицине известны случаи, когда у пар, имеющих генетическую несовместимость, благополучно рождались здоровые дети без медикаментозного лечения. То есть, если женщине удалось забеременеть и выносить малыша хотя бы первый триместр, скорее всего, она благополучно его родит.

Однако при таком диагнозе лучше не рисковать, ведь очень похожие гены могут вызвать различные патологии в развитии плода и привести к рождению больного ребенка. Поэтому выполненный еще при планировании беременности генетический анализ крови развернутого типа сможет оградить от возможных неприятных неожиданностей.

Когда необходимо сдавать анализ на совместимость

Желательно, чтобы будущие родители ещё до предполагаемого зачатия прошли клиническое обследование. Назначение необходимых анализов и выдача направления на обследование производится терапевтом и гинекологом. Когда все анализы отличные, а беременность не наступает, то причина может быть не в состоянии здоровья партнеров по отдельности, а скрываться в иммунологической совместимости пары.

Схожесть партнеров по показателям тканевой совместимости служит причиной недостаточной активности иммунной системы женщины, в результате в организме не запускаются реакции, которые необходимы для зачатия и сохранения беременности.

Нередко организм женщины воспринимает сперматозоиды мужчины, как вредоносные агенты, и начинает интенсивную выработку белков-антител, которые их обезвреживают, подавляя способность к оплодотворению. Невозможность встречи сперматозоидов с яйцеклеткой делает и наступление беременности невозможным.

Таким образом, случаи, когда необходимо сдавать анализ на совместимость, нередки. Для исключения возможности возникновения подобных проблем у пары, обоим нужно сдать анализ крови на совместимость, HLA-типирование.

Почему происходит выкидыш при генетической совместимости или не наступает беременность?

Ребенок при наследовании антигенов тканевой совместимости наследует половину антигенов от мамы, а половину от папы. Антигены должны быть разные! Вследствие этого ребенок, наполовину мамин, а наполовину папин. Тогда, организм женщины понимает, что это беременность, и запускает иммунологическую реакцию на сохранение беременности. Эти чужие клетки зародившегося ребенка воспринимаются как чужие, но материнский организм их не атакует, потому что вырабатываются защитные антитела для ребенка. Поэтому совместимость (когда разные антигены) по HLA-антигенам крайне важна при беременности для вынашивания малыша.

Когда антигены родителей совпадают, то женский организм воспринимает беременность, как свои клетки, поэтому не запускается в достаточной мере иммунологическая реакция на защиту ребенка. Плод становится незащищенным от атаки материнской иммунной системы. Это становится причиной невынашивания беременности и выкидыша. По этой же причине у некоторых пар не наступает долгожданная беременность.

Категории

АллергологАнестезиолог-реаниматологВенерологГастроэнтерологГематологГенетикГинекологГомеопатДерматологДетский гинекологДетский неврологДетский урологДетский хирургДетский эндокринологДиетологИммунологИнфекционистКардиологКосметологЛогопедЛорМаммологМедицинский юристНаркологНевропатологНейрохирургНефрологНутрициологОнкологОнкоурологОртопед-травматологОфтальмологПедиатрПластический хирургПроктологПсихиатрПсихологПульмонологРевматологРентгенологСексолог-АндрологСтоматологТерапевтУрологФармацевтФитотерапевтФлебологХирургЭндокринолог

Механизм проведения

Для проведения анализа оба супруга должны сдать кровь из вены в специальной лаборатории.

За две недели до этого желательно исключить употребление:

  1. Алкоголя.
  2. Сигарет.
  3. Антибиотиков.

Мужчина и женщина в этот момент не должны болеть, так как это может отразиться на результатах. После сдачи анализа полученный генетический материал изучают, а затем сравнивают характеристики обоих супругов. Для этого из крови выделяются лейкоциты, поскольку именно в них содержится небольшая концентрация антигенов.

Существует два метода исследования:

  • Кариотипирование – изучение хромосомного набора. Такой анализ проводится один раз и помогает выявить генетические патологии родителей. С помощью него диагностируется генетическая предрасположенность ко многим заболеваниям.
  • HLA-типирование, определяющее у супругов антигены тканевой совместимости.Антигены HLA-комплекса представлены тремя классами. Как правило, анализ направлен на исследование первого и второго класса генов (I класс: HLA-A, HLA-B, HLA-C, II класс: DR, DP, DQ).

Пациенты, решающие сдать анализ на совместимость могут пройти два разных теста – первого и второго класса. Но для большей информативности медики советуют проходить оба теста.

Антигены HLA-комплекса – это сложные белки, состоящие из отдельных частей (доменов), для каждого из которых существует больше двух вариантов (аллелей) одного и того же гена.

Поскольку разобраться в этих кодировках простому человеку почти невозможно, расшифровка результатов проводится специалистом-генетиком.

Некоторые ученые пришли к выводу, что благодаря генетическому разнообразию, которое дети получают от родителей разной национальности, их собственный генотип получает массу преимуществ. По их мнению, такие дети рождаются выше, красивее и образованнее, чем остальные.

Роль HLA-типирования при беременности

Для полноценного процесса вынашивания антигены матери и отца должны различаться. Эмбрион, сформированный вследствие соединения родительских клеток, обладает особыми антигенами, чужеродными для материнского иммунитета. Организм женщины при этом реагирует на новые клетки включением специальных механизмов, которые защищают плод: вырабатываются антитела-протекторы, которые подавляют специализированные NK – киллерные клетки. Если этот процесс по каким-либо причинам нарушается, последние начинают уничтожать эмбрион, что приводит к самопроизвольному прерыванию беременности. В случаях когда родительские антигены совпадают, ребенок будет являться носителем антигенов, аналогичных материнским. В этой ситуации женский организм считает эмбриональные клетки своими, а значит, в организме не запускаются защитные процессы для сохранности плода. Иммунитет женщины воспринимает плод как опухолевое заболевание и начинает процессы его уничтожения или приостанавливает деление клеток. В повседневной жизни это свойство антигенов спасает человека от развития многих заболеваний, однако в этом случае становится фактором возникновения некроза тканей зародыша и провоцирует выкидыш.

Комплекс гистосовместимости влияет на сами процессы оплодотворения, имплантацию зародыша в матке и вынашиваемость плода. Наблюдается прямая зависимость: чем больше HLA-генов оказалось у супругов схожими, тем больше риск наступления выкидыша. Около 30 % пар с повторяющимися выкидышами имеют по нескольку совпадений. Если обнаружено четыре и более сходных генов, то безуспешные попытки ЭКО и невынашиваемость будут отмечаться практически во всех случаях.

Для полноценного процесса беременности крайне важно не только количественное совпадение у супругов, но и сами аллели HLA-генов у них. Так, в семьях с тремя выкидышами при расшифровке HLA-типирования выявлено повышение числа некоторых антигенов: у женщин – DQB1 0501, 0301, 0602; у мужчин – DRB1 12,10; DQA1 0102, DQA1 0102, 0301; DQB1 0602, 0501

Что делать при генетической совместимости по HLA-антигенам?

Беременности при генетической несовместимости сохраняли еще 30 лет назад. Тогда брали кусочек кожи у супруга и подшивали ее беременной. Вся атака иммунной системы матери шла на чужеродный лоскут кожи, а не на ребенка. Также чистилась кровь различными препаратами, и подавлялся материнский иммунитет. Сейчас дело обстоит лучше. Медицина продвинулась вперед.

Существуют определенные методики и препараты, которые помогают, как забеременеть при генетической совместимости, так и выносить, сохранить ребенка. Эта проблема не единична. Дети в таких семьях рождаются нормальными, полноценными. Хотя врачи могут предупреждать, что у детей может быть ослаблена иммунная система.

Главное для такой пары найти хорошего специалиста, который бы вел их с момента зачатия и до родов. При этом нужно выполнять все требования врача. Без медикаментозного сохранения беременности таким супругам не обойтись.

Почему происходит генетическая несовместимость, сказать сложно. Главное не расстраиваться и идти к цели – иметь детей. Все возможно!

Иммунизация беременной женщины

Иммунизация – наиболее распространенная методика борьбы с HLA-идентичностью. Но на сегодняшний день возможны иные варианты поддержания беременности. После получения результатов исследования врач может рекомендовать применение иммунизации, которая бывает пассивной и активной.

При активной будущей матери вводят концентрированные лимфоциты мужа. Таким образом, ее организм учится узнавать клетки супруга. Некоторые научные исследования приводят данные о 55 процентах положительных результатов после проведенной процедуры.

Пассивную иммунизацию проводят при помощи специальных препаратов — иммуноглобулинов («Интраглобин», «Октагам», «Иммуновенин» и др.). Начинается такая процедура до зачатия, продолжается около трех месяцев. После этого прописываются курсы, поддерживающие беременность. Подобная методика применяется при осуществлении экстракорпорального оплодотворения.

Генетический анализ на антигенную совместимость пары поможет выяснить, является ли невынашивание или бесплодие следствием генетической несовместимости людей. В случае подтверждения этого не следует терять надежду на деторождение: современная медицина, благодаря многочисленным научным испытаниями и разработкам ученых-генетиков, способна решить такую проблему и помочь супругам выносить и родить здорового малыша. При этом родителям необходимо учесть, что им предстоит очень долгий процесс прохождения обследований и в случае наступления беременности постоянное наблюдение у специалиста.

Иммуноцитотерапия при генетической несовместимости

Методику иммуноцитотерапии разработали и внедрили в практику русские врачи. Уже много лет с ее помощью многие семейные пары реализовывают себя в качестве родителей. Безусловным плюсом методики является ее эффективность и отсутствие осложнений после проведения. Более того, она не приносит болезненных ощущений.

Как проходит процедура

За определение группы крови и ее резус-фактор несут ответственность эритроциты, которые удаляются из крови мужа. Оставшиеся лейкоциты не несут такой информационной нагрузки, они нейтральны. Поэтому эти показатели не имеют значения для проведения процедуры.

После проведенной инъекции женщина может ощущать в месте ее введения небольшое покраснение и зуд. Через несколько дней симптомы исчезнут самостоятельно.

Как только лимфоциты супруга проникли в кровь будущей мамочки, ее иммунитет начинает интенсивно поставлять антитела. Они и станут в дальнейшем надежными защитниками плода и плаценты от гибели.

Этапы иммуноцитотерапии

Иммуноцитотерапия проводится в несколько этапов, каждый из которых необходим для эффективного результата. • Первый — введение лейкоцитов проводят согласно рекомендации врача; • Вторая инъекция проводится через 7 дней после первой. Сразу же после процедуры супругам нужно приступить к зачатию; • Третий этап введения раствора проводят только тогда, когда зачатие произошло; • Последние две инъекции гинеколог назначит индивидуально в течение первого триместра беременности.

Беременность и HLA

Анализ на HLA-совместимость партнеров становится очень актуальным в теме бесплодия. Всегда существуют случаи, когда у здоровой женщины наблюдается самопроизвольное прерывание беременности на ранних сроках. Большинство таких эпизодов остаются незамеченными и списываются на задержку менструации.

При ЭКО такие ситуации наблюдаются еще чаще, поскольку четко фиксируются докторами, ожидающими положительного результата. Отчаявшиеся женщины хотят знать причину, по которой произошло прерывание беременности и тут на помощь приходит HLA-анализ. Выясняется, что у супругов есть совпадение по нескольким генам. Повторимся еще раз, что это не означает, что пара несовместима, а просто у них среди нескольких тысяч комбинаций генов обнаружились схожие. Это не повод искать проблему и говорить о биологической несовместимости супругов.

Происхождение теории биологической несовместимости

Исследование проведенные на животных показали, что чаще всего оплодотворение происходит в случаях когда яйцеклетка и сперматозоид обладают разными комбинациями генов HLA. Природа стремится к выживанию и генетическому разнообразию, поэтому самое жизнеспособное потомство получается при браке с генетически непохожим партнером.

После отдельных исследований на поверхности сперматозоидов обнаружили антигены HLA, и была выдвинута гипотеза, что прерывание беременности связано с иммунологическим конфликтом биологически совместимой пары.

Нет доказанных данных о влиянии совместимости супругов на невынашивание беременности.

Среди предложенных вариантов лечения: переливание отмытых лимфоцитов супруга, подшивание кусочка кожи беременной, введение иммуноглобулинов во время беременности – ни один не показал доказанного результата.

В настоящее время такие способы признаны неэффективными, а анализ на HLA и иммунологическая коррекция не рекомендуются у супругов с привычным невынашиванием беременности.

Виды генетического анализа

В зависимости от цели проведения исследования выделяют следующие виды генетического анализа:

  • ДНК-анализ;
  • кариотипирование.

ДНК-анализ

Анализ крови ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) – это исследование, позволяющее идентифицировать человека в процессе изучения уникальной последовательности нуклеотидов. Данный «генетический след», является индивидуальным для каждого человека (за исключением однояйцевых близнецов) и в течение жизни не изменяется.

Молекулярно-генетические исследования крови позволяют определить:

  1. Возможные заболевания. Исследование биологического материала на ДНК позволяет вовремя обнаружить наследственные болезни. Если в семье зафиксированы случаи психического расстройства или онкологии, с помощью данного теста определяется предрасположенность к развитию у потомков схожей проблемы.
  2. Индивидуальную непереносимость медикаментов. В случаях, когда имеются подозрения на повышенную чувствительность к определённой группе препаратов, может быть показан ДНК-анализ.
  3. Степень родства. Одной из самых частых причин для проведения исследования является необходимость установления родственных связей между людьми.
  4. Факторы бесплодия. В репродуктивных центрах парам, имеющим трудности с зачатием, в обязательном порядке назначают ДНК-тест.
  5. Склонность к развитию алкоголизма или наркомании. Подобную предрасположенность можно установить за счёт определения генов, ответственных за синтез ферментов для расщепления молекул алкоголя и других соединений.

Кариотипирование

Под кариотипированием понимают методику цитогенетического анализа, благодаря которому удаётся исследовать хромосомный набор человека. Подобное обследование проводится среди супружеских пар желающих завести ребёнка.

Кариотип – хромосомный набор каждого человека, содержащий полную характеристику признаков всех его составляющих, их:

  • количество;
  • форму;
  • размер и т. д.

В геноме человека содержится 46 хромосом, которые, в свою очередь, делятся на 23 пары.

Аутосомные (первые 44) — предназначены для передачи наследственных признаков: (цвет волос, глаз, анатомические особенности).

Последняя хромосомная пара является половыми хромосомами, с помощью которых удаётся определить кариотип:

  • женщины (23XX);
  • мужчины (23XY).

Основными задачами назначения кариотипирования являются:

  1. Определение несоответствия в хромосомном наборе супругов. Анализ проводится для предотвращения рождения детей с пороками развития или другими генетическими патологиями.
  2. Выявление количества и принадлежности хромосом, характеристика их структуры.
  3. Установление причины бесплодия, проявляющиеся в изменении кратности хромосом.

Вывод

HLA (человеческие лейкоцитарные антигены) — это совокупность антигенов, расположенных на 6 хромосоме, которые выполняют множество функций. Многие люди могут знать, что от этих генов зависит приживаемость органов и тканей при пересадке. Однако лишь немногие знают, что HLA также влияет на способность к зачатию. Дело в том, что человеческие лейкоцитарные антигены выполняют иммунную функцию в организме — без их существования лимфоциты не могут опознать «чужие» клетки. Во время беременности HLA-клетки матери подавляют активность HLA-клеток отца, что приводит к тому, что лимфоциты не воспринимают клетки плода в качестве инородного организма. Однако это происходит лишь в случае, если HLA-наборы отца и матери отличаются друг от друга; если они идентичны, то плод уничтожается и вымывается из организма. Объяснение этому следующие — с точки зрения эволюции выгодно, чтобы у отца и матери были разные иммунные системы, поскольку это сильно повысит иммунные силы их ребенка.

Для определение способности к зачатию врачи могут назначить HLA типирование. HLA типирование — это специальный тест, который покажет, насколько лейкоцитарные антигены отца и матери схожи. Это позволяет определить причину бесплодия (хотя иммунная несовместимость является далеко не единственной причиной бесплодия). Существует два метода HLA-типирования — серологический и молекулярно-генетический. Первый метод основан на анализе самих антигенов, а второй — на анализе цепочки ДНК, которая и создает эти антигены. Второй вариант типирования понемногу вытесняет первый, поскольку он более точный и имеет гораздо меньше недостатков. Если тесты показали, что у родителей лейкоцитарная несовместимость, врач может назначить лечение. Лечение представляет собой прием специальных иммунных лекарств (Интраглобин, Октагам и другие), которые позволяют подавить активность HLA и лимфоцитов, что значительно повышает шансы на приживаемость плода.

Ссылка на основную публикацию